Bojenje po Gramu (Gram preparat)

Redakcija LabMedicina.org

Bojenje po Gramu je osnovna mikrobiološka metoda koja omogućava brzu identifikaciju i podjelu bakterija na Gram-pozitivne i Gram-negativne.

Bojenje po Gramu je jedna od najvažnijih i najčešće primjenjivanih diferencijalnih metoda u mikrobiološkoj laboratorijskoj dijagnostici. Ova tehnika koristi specifičan niz boja kako bi se bakterije u mikroskopskom preparatu podijelile u dvije velike grupe: Gram-pozitivne (koje se boje tamnoljubičasto) i Gram-negativne (koje se boje ružičasto ili crveno). Razlika u bojenju direktno ovisi o hemijskom sastavu i debljini peptidoglikanskog sloja u ćelijskom zidu bakterije. Analiza omogućava brz uvid u prisustvo, morfologiju (koki, bacili) i raspored mikroorganizama u biološkom uzorku.

Kome se test preporučuje

Ovaj test se koristi kao prva linija dijagnostičke obrade kod sumnje na različite bakterijske infekcije. Indikacije obuhvataju:

  • Sumnju na akutne infektivne procese poput upale pluća, meningitisa ili urinarne infekcije.
  • Dijagnostiku infekcija rana, gnojnih kolekcija, apscesa i opekotina.
  • Pregled urogenitalnih brisova kod simptoma uretritisa ili vaginitisa.
  • Analizu sterilnih tjelesnih tečnosti (likvor, sinovijalna, pleuralna ili peritonealna tečnost).
  • Potrebu za brzim usmjeravanjem izbora početne empirijske antibiotske terapije.

Priprema i uzorak

Za izradu Gram preparata mogu se koristiti različiti biološki materijali: bris ždrijela, nosa, rane ili urogenitalnog trakta, sputum, gnoj, urin ili punktati tjelesnih tečnosti. Od presudne je važnosti da se uzorak uzme prije započinjanja bilo kakve antibiotske terapije, jer prisustvo antibiotika može promijeniti strukturu ćelijskog zida bakterija i otežati ili onemogućiti njihovo uočavanje i tačnu identifikaciju. Specijalna priprema pacijenta zavisi od vrste uzorka, ali općenito uključuje izbjegavanje primjene lokalnih antiseptika neposredno prije uzimanja brisa.

Tumačenje nalaza

Nalaz bojenja po Gramu pruža preliminarne, ali izuzetno dragocjene informacije o prisutnim mikroorganizmima i upalnim ćelijama.

  • Prisustvo Gram-pozitivnih bakterija: Najčešće se radi o stafilokokama, streptokokama, enterokokama ili pneumokokama, zavisno od morfologije i kliničke slike.
  • Prisustvo Gram-negativnih bakterija: Ukazuje na prisustvo uzročnika kao što su Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae ili Neisseria vrste.
  • Uočeni leukociti (polimorfonuklearci): Potvrđuju prisustvo aktivne upalne reakcije u organizmu.
  • Odsustvo bakterija: Znači da mikroskopskim pregledom nisu uočeni mikroorganizmi, što ipak ne isključuje infekciju uzrokovana bakterijama koje se ne boje po Gramu.

Važne napomene

Bojenje po Gramu je brza i orijentaciona metoda koja pruža preliminarne rezultate, ali ne može zamijeniti mikrobiološku kultivaciju uzorka i izradu antibiograma koji su neophodni za definitivnu identifikaciju uzročnika i ispitivanje osjetljivosti na lijekove. Određene specifične bakterije, poput mikoplazmi, hlamidija ili mikobakterija, ne mogu se vizualizirati ovom metodom. Tumačenje nalaza uvijek mora biti usklađeno s ostalim laboratorijskim i kliničkim nalazima od strane ljekara.